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測試盒幫助您輕松監(jiān)測DNA及RNA樣本的質(zhì)量和濃度
2023-03-14產(chǎn)品中心/ products
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒我司竭誠為廣大科研用戶提供全面,優(yōu)質(zhì),價格優(yōu)勢的產(chǎn)品,免費為您提供全程技術(shù)指導(dǎo),解決您的后顧之憂。提供產(chǎn)品訂制包裝,免費快遞送貨上門,質(zhì)量保證。我司產(chǎn)品齊全,因上架數(shù)量有限,未能全部上架,如需訂購或者產(chǎn)品詳情請直接聯(lián)系我司銷售!
聯(lián)系電話:0755-28019324
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | RQ-T27902 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 100管/96樣 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研試驗 | 品牌 | 瑞清 |
方法 | 微量法 | 售后 | 專屬服務(wù) |
可售地 | 全國 | 保存條件 | 低溫保存 |
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒
我司產(chǎn)品齊全,因上架數(shù)量有限,未能全部上架,如需訂購或者產(chǎn)品詳情請直接聯(lián)系我司銷售!
測定意義:
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負責(zé)延長淀粉的 α-1,4- 葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。
在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數(shù)量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物,歡迎
儀器:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
使用須知:
(1)請參照相關(guān)法規(guī)、文獻、MSDs等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到--次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一-試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
(4)購買后,請務(wù)必確認標(biāo)簽上的注意事項;做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標(biāo)簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
生化試劑的種類與等級說明:
(1)免疫試劑包括抗體及抗血清、正常血清及補體、抗原、免疫組織化學(xué)研究用試劑、細胞培養(yǎng)用試劑、細胞分離試劑、凝膠內(nèi)擴散法及電泳試劑等。
(2)基因工程用試劑包括基因表達與基因重組、人工合成蛋白、激素、核酸合成試劑、內(nèi)切酶等。
(3)誘變劑和主要供測定工作場所與生活環(huán)境中的毒物質(zhì)的致癌性與化學(xué)毒物的致突變性。
(4)工業(yè)用化學(xué)品包括試制開發(fā)的工業(yè)用化學(xué)品,有四千種以上,還在不斷增加。
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說明書。
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
為了達到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,取用試劑時應(yīng)遵守以下規(guī)則,以保證試劑不受污染和不變質(zhì):
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,*不準(zhǔn)用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
另外取用試劑時應(yīng)本著節(jié)約精神,盡可能少用,這樣既便于操作和仔細觀察現(xiàn)象,又能得到較好的實驗結(jié)果。
淀粉磷酸化酶(SP)測試盒
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